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牙鲆鱼苗病害防治实验的探讨

放大字体  缩小字体 发布日期:2019-11-30
核心提示:随着牙鲆鱼养殖业的发展,各类病害肆虐,其中以暴发性流行细菌病的危害最为严重。本试验主要研究由致病性弧菌、嗜水气单胞菌、爱




随着牙鲆鱼养殖业的发展,各类病害肆虐,其中以暴发性流行细菌病的危害最为严重。本试验主要研究由致病性弧菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌引起的红头、红体、体表鳍条溃烂、腹水等疾病的防治,从而提高苗种培育与商品鱼养殖的成活率,提升经济效益。

一、实验器材

1 . 诊断选药盒。现在市面上有销售成品的方便型诊断选药盒,每次可进行16种抗菌药物的筛选实 验,分别是:四环素、氧氟沙星、复方新诺明、青霉素、硫酸粘杆菌素、罗红霉素、庆大霉素、新霉素、强力霉素、恩诺沙星、链霉素、氟苯尼考、诺氟沙星、阿米卡星、头孢拉定、阿莫西林。其他参考试验药片分别是:土霉素、头孢氨苄、阿奇霉素、卡那霉素、头孢噻呋钠、TMP、盐酸克林霉素、甲硝唑、替米考星、泰乐菌素、磺胺问甲氧嘧啶、大观霉素、红霉素、盐酸沙拉沙星、舒巴坦钠、盐酸二氟沙星。

2 . 自制培养基。培养皿、试管、消毒生理盐水、蛋白胨、琼脂、高压锅等。每个可做4~8个种类的药物选别。

3 . 生物杀菌剂。市售针对弧菌、单胞菌等的嗜细菌类生物制剂。

4 . EM菌、硝化宝等微生物制剂,分解水体中有机物、氨氮、亚硝酸氮等。

5 . 剪刀、解剖刀、镊子、托盘等。

6 . 无菌操作台、酒精灯、培养箱、显微镜等。

二、实验方法

实验有两个要点,一是用传统的抗菌素治疗,通过使用诊断选药盒选取对致病菌作用最有效的抗菌素,进行药浴及投喂药饵防治;二是通过生物杀菌剂进行针对性治疗实验和生物杀菌剂加EM菌、其他微生物改良制剂的预防感染实验。

实验从三个方面进行:一是疾病治疗,利用诊断选药盒选取最佳抗菌药和用生物杀菌剂进行疾病治疗实验;二是利用特定病原菌进行疾病感染和治疗的实验;三是根据治疗实验的效果,进行针对性的疾病预防实验。

1 . 疾病治疗实验

(1) 当鱼类出现活动异常、摄食不良、死亡增加及表现出一定的病征,采集病鱼的病灶部位进行细菌培养, 用诊断选药盒进行选药实验,选取对致病菌作用力最强的抗菌药用于疾病治疗。

(2) 治疗实验分两组,每组分别使用2~500升的小水池,各放入发病的鱼苗200尾,抗菌药分别用10毫克/升药浴4小时,按每千克鱼体重100毫克投喂药饵连续5天;5毫克/升药浴4小时,按每千克鱼体重50毫克投喂药饵连续5天。进行效果对比。

2 . 感染实验

(1) 采集大量发病水池内病鱼病灶部位进行细菌分离培养鉴定,获取致病性弧菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌。

(2) 分别对分离获取的三种细菌进行诊断选药盒选药实验,选择对病原菌作用最强的抗菌药用于实验。同时大量培养三种细菌,达到用于攻击感染实验的用量,以便进行健康鱼苗的攻击感染实验。

(3) 实验组合设定。致病菌的组合:三个单一菌种攻击感染实验(弧菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌),混合菌种攻击感染实验(弧菌+嗜水气单胞菌、弧菌+爱德华氏菌、嗜水气单胞菌+爱德华氏菌)共6种攻击感染实验组,分别编号为实验组1~6,同时设定一个无细菌攻击感染的对照组。以500升实验水池为例,每组8个500升实验小水池,入池鱼苗各200尾。根据需要,选择相应感染实验类型。

(4) 感染实验的实施

A. 选取全长5厘米左右的健康鱼苗,鱼苗摄食状态良好,每日死亡在0.1%以下。

B. 在相应的水池各放紫外线杀菌海水300升,分别移入200尾鱼苗。

C. 对照组2个水池,不添加任何细菌。每个感染实验组6个水池,2 个不作任何处理; 2 个采用诊断选药盒选取的抗菌药10毫克/升药浴4小时后换水,每天1 次,同时按每千克鱼体重100毫克口服,连续3~5天1个疗程;2个采用生物杀菌剂2 毫升/米3,药浴4 小时后换水,连续5 天。

D. 实施感染的实验水池分别按照致病菌1×105细胞数/毫升进行接种,24小时内不换水,24小时后开始转入正常培养;或者在投喂的配合饲料中喷洒接入适量相应的致病菌,当开始发现有鱼苗异常时实施相应治疗措施等。

(5)实验时间及注意事项。实验期间15天,每天吸污并记录相应水池内死鱼数量、活力和摄食情况。所有实验水池工具专池专用,严格控制交叉感染,日常操作中对照组优先进行。第15天,实验结束,统计在池鱼苗数量、活力和摄食等情况,进行数据分析。

3.预防感染实验

(1)根据诊断选药盒选取的效果最强的抗菌药和生物杀菌剂及EM菌进行病菌疾病预防实验。

(2)一般采用200~1000升的小水池进行预防实验,设定对照组、生物组、抗菌药组,每组各2个平行实验水池。

对照组:正常管理,不加任何药物、生物制剂;生物组:生物杀菌剂2毫升/米3+EM菌2毫升/米3,每3天一次预防接种,定期投喂药饵,每千克饲料加入生物杀菌剂1毫升+EM菌1毫升,与水中投放同时进行;抗菌药组:根据诊断选药盒选取的作用力强的抗菌药设定1~3个实验组,采用定期添加2毫克/升的相应抗菌药进行预防感染,每3天预防一次,同时投喂药饵,按照鱼苗体重每千克添加抗菌药20毫克,与水中投放同时进行。

(3)实验期间及注意事项。实验期共40天,选取平均全长5厘米的鱼苗开始进行预防实验,期间按照鱼苗体重的3%~4%投喂全价配合饲料,每天流水300%~500%,每天两次吸除池底污物,发现死鱼及时捞除,记录每天鱼苗死亡数量、摄食情况,每周一次测量鱼苗全长、体重,调整投饵量。第40天实验结束,统计每个水池在池鱼苗数量、全长、体重等生长情况。根据实验数据分析预防效果,确定最佳预防方法。

三、实验实施中防止病原菌扩散的措施

1.用于细菌培养实验的器材使用前后经过高温高压消毒,废弃物也要经过高温高压消毒灭菌后再丢弃。

2.实验水池等由专人负责管理,日常进出车间要进行严格消毒,更换专用水鞋、外套进入车间,实验水池有相应的专用工具。

3.由于实验期间培养大量的病原菌,为了防止病原菌污染周围环境,实验在独立的车间内进行,排出的废水经统一回收,用50毫克/升漂白精消毒24小时后,再用硫代硫酸钠50毫克/升中和后排放。实验全部结束后对整个车间用含200毫克/升有效氯的漂白精溶液全面喷洒消毒,杀灭病原菌。
 
 
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